Présentation de l’IGM
La station d’imagerie de l’IGM est un service commun, localisée au 1er étage du bâtiment 400. Elle est composée d’un vidéo-microscope 4-5D à déconvolution, un stéréo-microscope motorisé, un microscope à épifluorescence et une station de traitements d’images.
Vidéo-microscope 4-5D
Le vidéo-microscope 4-5D (DMIRE2, Leica) est un système qui a été optimisé pour les acquisitions sur cellules vivantes avec une résolution temporelle et spatiale optimale pour un microscope champ large. Il permet l’acquisition rapide d’images d’échantillons vivants ou fixés (bactéries, levures, champignons filamenteux, nématodes, cellules de mammifères…).
Ce microscope inversé à épifluorescence est motorisé et piloté par le logiciel MetaMorph (Universal Imaging Corporation) permettant une acquisition automatisée dans les trois dimensions de l’espace, au cours du temps et en plusieurs couleurs.
Il est composé de :
- Deux sources lumineuses et plusieurs jeux de filtres *
- plusieurs prismes pour le contraste de Nomarski (DIC)
- quatre objectifs : un objectif 100x monté sur un moteur piezo électrique pour un déplacement rapide sur l’axe z et des objectifs 63X, 40X et 20X
- une platine motorisée pour les acquisitions multi-champs
- une caméra CCD Cool SNAP HQ2 (Roper)
- une enceinte thermostatée pour l’observation des échantillons vivants
* Sources lumineuses et jeux de filtres :
une lampe Xénon associée aux filtres :
| Position | Filtre | Excitation | Miroir dichroïque | Emission | Référence |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | GFP | 457-487 | 495 | 502,5-537,5 | Semrock 3035B |
| 2 | TXRED | 542-582 | 593 | 604-644 | Semrock |
| 3 | CY5 | 590-650 | 660 | 662,5-737,5 | Leica |
| 4 | A4 (Dapi) | 340-380 | 400 | 450-490 | Leica |
Un système de LED (Lumencor-Optoprim) permettant un changement de longueur d’onde rapide et offrant 6 longueurs d’ondes différentes pour la visualisation des protéines fluorescentes CFP, GFP, YFP, mCherry, ainsi que les marqueurs fluorescents comme le DAPI et la CY5
Stéréo-microscope motorisé
Le stéréo-microscope (Lumar V12, Zeiss) permet l’observation et le criblage de populations de micro-organismes et organismes. Cet équipement est motorisé afin de réaliser une acquisition selon l’axe z. L’observation des échantillons est possible en lumière transmise et en fluorescence (filtre GFP).
Microscope à épifluorescence
Ce microscope (Zeiss) est à votre disposition pour une observation de contrôle de vos échantillons. Il est équipé de filtres GFP et DAPI.
Station de traitements d’images
Cette station comporte un ordinateur équipé du logiciel MetaMorph (Universal Imaging Corporation). Elle offre entre autres la possibilité de déconvoluer les stacks d’images acquis sur le vidéo-microscope et de réaliser des reconstructions tridimensionnelles. Le traitement par la déconvolution apporte une meilleure résolution des images acquises en réattribuant au mieux la lumière diffractée à son point d’origine.
- Image non traitée - Image déconvoluée
Contact : Magali Prigent